为华生物磷脂聚乙二醇生物素的应用案例

为华生物供应DSPE-PEG-BIOTIN磷脂聚乙二醇生物素

DSPE-PEG-BIOTIN材料应用案例：

生物素化微泡的亲和素靶向性实验

1.亲和素包被细胞培养板：首先配制亲和素溶液，电子天平精密称取适量亲和素粉末，以PBS溶解，得2.5 μg/mL的亲和素溶液。随后在细胞培养板(35 mm) 中央滴加100 μL亲和素溶液，形成直径约1 cm的液体层，4 ℃过夜。用PBS洗涤3次，0.3%的牛血清白蛋白(BSA)封闭2 h，再次以PBS洗涤3次。

2.配制DSPE-PEG(2000)Biotin溶液:电子天平精密取适量DSPE-PEG(2000)Biotin粉末，溶于PBS (10mM, pH7.4) 中，待其完全溶解, 呈透明澄清液体，浓度为1 mM，使用时稀释到100μM。

3. DSPE-PEG(2000)Biotin对脂质微泡膜的嵌入：取微泡混悬液1 ml,加入DSPE-PEG(2000)Biotin ( 100 mM)溶液150 mL，室温轻摇混合反应1 h。漂浮法洗涤3次除去游离的DSPE-PEG(2000)Biotin,即获得生物素化微泡。

4.检测生物素化微泡对亲和素包被板的靶向结合能力:将亲和素包被板倒置放入微泡混悬液中，使微泡上浮与亲和素包被板接触，反应20 min 后，PBS洗涤3次,置于显微镜下观察。同时以未生物素化的普通微泡为对照，比较洗涤前后亲和素包被板上所附微泡的数目多少。

文献：

[1] 翁慧芳. 超声微泡复合载体的制备及其效率研究—SonoVue与脂质体的耦联[D].浙江大学,2

[2] Dong D, Zhu L, Hu J, et al. Simple and rapid extracellular vesicles quantification via membrane biotinylation strategy coupled with fluorescent nanospheres-based lateral flow assay[J]. Talanta, 2019, 200: 408-414.

[3] Gao H, Kam C, Chou T Y, et al. A simple yet effective AIE-based fluorescent nano-thermometer for temperature mapping in living cells using fluorescence lifetime imaging microscopy[J]. Nanoscale Horizons, 2020, 5(3): 488-494.