DBCO（二苯基环辛炔）-PEG（聚乙二醇）-ICG（吲哚菁绿）的合成

一、合成原理与材料

DBCO-PEG-ICG构成：

DBCO：点击化学基团，与N?进行SPAAC反应，实现生物正交偶联。

PEG：亲水链段，增强生物相容性和稳定性，降低免疫原性。

ICG：近红外荧光染料，适用于体内成像（λ_abs/em≈780/820 nm）。

材料：

DBCO-PEG-NH?（PEG分子量按需，如2 kDa）

ICG（纯度≥95%）

交联剂：EDC/NHS

溶剂：DMSO/DMF

缓冲液：PBS（pH 7.4）

二、合成步骤

ICG羧基活化

条件：ICG + EDC/NHS（1:2:2摩尔比），DMSO中室温搅拌2小时。

监测：TLC/HPLC确认。

偶联DBCO-PEG-NH?与活化ICG

投料比：1.2:1（摩尔比）

条件：N?保护，室温避光反应12-24小时。

pH：无需严格调控（4-11）。

纯化与表征

纯化：HPLC（C18柱，梯度洗脱），超滤（3 kDa）。

表征：NMR（PEG-ICG连接），UV-Vis/荧光光谱（ICG光学性质），MALDI-TOF MS（纯度>95%）。

三、优化要点

反应浓度：5-10 mM，避免过高导致交联，过低影响速率。

溶剂：DMSO（注意PEG结构保护）/DMF（需除水）。

避光：全程避光操作（锡纸包裹，黄光环境）。

储存：冻干后-20℃保存，避免反复冻融。