多肽AAVTLAHEL丨Angiopep-2的合成优化与功能验证

AAVTLAHEL的合成需兼顾多肽序列的精确性与化学修饰的兼容性。其核心步骤包括：采用Fmoc固相合成法，以2-氯三苯甲基氯树脂为载体，依次偶联AAVTLAHEL的氨基酸残基；末端的羧基通过HBTU/DIEA体系与氨水反应，引入氨基功能团；最终通过TFA裂解树脂并脱保护，获得目标分子。纯化过程采用制备型HPLC，纯度可达98%以上。

物理性质方面，该多肽在D?O中的核磁共振氢谱（1H NMR）显示，N端氨基质子信号出现在δ 7.0-7.3 ppm，验证了末端氨基的成功引入。等温滴定量热法（ITC）数据显示，AAVTLAHEL与整合素α?β?受体的结合常数为1.2×10? M?1，表明其具有高亲和力。此外，该多肽在血清中的半衰期为1.2小时，较未修饰多肽延长3倍。

化学活性研究聚焦于末端氨基的反应性。例如，与NHS活化的聚乙二醇（PEG-NHS）反应后，可形成分子量约5 kDa的PEG化多肽，显著延长其在小鼠血浆中的半衰期（从1.2小时延长至10小时）。此外，该多肽可与马来酰亚胺修饰的量子点（QDs）通过迈克尔加成反应偶联，构建具有荧光成像能力的纳米探针。

生物活性验证实验显示，AAVTLAHEL在体外可特异性结合整合素α?β?受体，IC??值为15 nM，较未修饰多肽提升4倍。在裸鼠皮下移植瘤模型中，其负载的阿霉素纳米粒对肿瘤生长的抑制率达70%，且无明显系统性毒性。这些数据证实了末端修饰在提升药效与药代动力学性能中的关键作用。