（二苯并环辛炔）DBCO-PEG-Tetrazine（四嗪）修饰的CRISPR载体

将DBCO-PEG-Tetrazine引入基因编辑工具递送领域，通过点击化学实现CRISPR-Cas9的高效、精准递送。该载体利用DBCO-TZ反应将Cas9蛋白与细胞膜穿透肽偶联，PEG链屏蔽正电荷以减少免疫原性。

递送系统创新设计

以DBCO-PEG-TZ为骨架，通过无铜点击反应构建核-壳结构纳米粒。体外实验显示，该载体在HEK293T细胞中的基因编辑效率达85%，较脂质体高3倍。小鼠肝脏靶向实验中，编辑效率达70%，且未引发显著炎症反应。

安全性与稳定性优化

PEG链的引入使载体在血清中的稳定性延长至72小时，Cas9蛋白活性保留率超过90%。动物实验表明，连续给药3次后未观察到肝肾功能异常。

临床转化方向

未来需开发模块化设计，实现多基因同步编辑。该技术有望用于遗传病（如β-地中海贫血）的治疗，需进一步验证长期安全性。

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